細胞計數是細胞培養過程中(zhōng)，了解細胞生活狀态和鑒别細胞死活，确定細胞接種濃度、數量以及了解細胞存活率和增殖度等最基礎的實驗過程。早前已經介紹過不同類型的細胞最适用(yòng)的計數方法，本期為(wèi)大家介紹我們Countstrar家族新(xīn)成員Mira系列細胞計數儀，帶大家走進Countstar Mira和細胞計數的二三事。
Mira跟我們之前Countstar細胞計數儀成員對比有(yǒu)哪些特色呢(ne)？
本篇主要展示的是明場的“變倍”技(jì )術。Mira在明場計數上增加了我們獨創的“變倍”技(jì )術，分(fēn)别為(wèi)5倍、6.6倍、8倍的放大倍數，用(yòng)于捕獲不同粒徑大小(xiǎo)細胞的清晰圖像，可(kě)以根據細胞粒徑的大小(xiǎo)以及期望細胞成像效果選擇理(lǐ)想的放大倍數進行圖像計數，下圖1為(wèi)T細胞和小(xiǎo)球藻分(fēn)别在不同放大倍數下檢測的原始圖片。我們都知道明場細胞計數主要是根據細胞中(zhōng)心透光度辨别細胞活似，細胞成像圖片越清晰透光度越明顯，活死判斷更精(jīng)準，實現一台儀器同時滿足大細胞小(xiǎo)細胞活率的準确計數。
圖1、細胞在不同放大倍數下細胞圖像及推薦使用(yòng)表
那麽不同放大倍數下，Mira檢測結果如何呢(ne)？下面數據均是以小(xiǎo)細胞T細胞為(wèi)例，進行數據對比。具(jù)體(tǐ)方案是采用(yòng)相同高濃度的細胞樣本通過梯度稀釋後，對比Mira 的不同放大倍數條件下，采用(yòng)台盼藍染色方法檢測對比其結果偏差。如下圖2，細胞總濃度、活細胞濃度、活率、直徑等在不同放大倍數下檢測結果偏差均小(xiǎo)于10%。
圖2、分(fēn)别是不同放大倍數檢測梯度稀釋樣本的偏差
不同放大倍數條件下，Mira檢測T細胞的線(xiàn)性梯度R^2可(kě)達0.999x，如下圖3均可(kě)得到很(hěn)好的線(xiàn)性梯度。
圖3、不同放大倍數檢測的樣本梯度線(xiàn)性
跟大家公(gōng)認的Countstar“機皇”Rigel系列對比，熒光場AO/PI檢測結果有(yǒu)何差異呢(ne)？具(jù)體(tǐ)方案和台盼藍檢測方法一緻，相同高濃度的細胞樣本通過梯度稀釋後，同一個樣本分(fēn)别采用(yòng)Mira FL和Rigel熒光場AO/PI方法檢測對比結果，下圖4是Mira和Rigel熒光場準确性對比，如下圖4數據，濃度和活率兩台儀器檢測偏差均在10%以内。
圖4、Mira FL與Rigel熒光場AO/PI線(xiàn)性梯度數據對比
如下圖5兩台儀器檢測線(xiàn)性梯度R^2為(wèi)0.99XX。
圖5、Mira FL和Rigel S2熒光場AO/PI線(xiàn)性梯度
Mira保證原有(yǒu)的準确性和穩定性，下圖6 Mira與Rigel S2熒光場AO/PI穩定性對比，兩台儀器檢測相同樣品複孔間的偏差均小(xiǎo)于7%。，說明Mira檢測結果和Countstar“機皇”Rigel準确性、穩定性一緻。
圖6、Mira 與Rigel S2熒光場AO/PI複孔偏差
